植物組織培養技術

  1. 用于組織培養的植物組織的制備是在無菌條件下,由層流柜提供的HEPA過濾空氣中進行的。
  2. 將組織在無菌容器中培養,例如培養皿中的陪替氏培養皿或燒瓶中,其溫度和光強度均受控。
  3. 來自環境的活植物材料在其表面(有時是內部)上自然受到了微生物的污染,因此在獲取合適的樣品(稱為外植體)之前,應先用化學溶液(通常是酒精,次氯酸鈉或次氯酸鈣)對它們的表面進行滅菌處理。
  4. 然后通常將無菌外植體置于無菌固體培養基的表面上,但有時直接置于無菌液體培養基中,特別是在需要細胞懸浮培養時。
  5. 固體和液體介質通常由無機鹽加上一些有機營養素,維生素和植物激素組成。固體培養基是從液體培養基中加入膠凝劑(通常是純化的瓊脂)制成的。
  6. 培養基的成分,特別是植物激素和氮源(硝酸鹽對銨鹽或氨基酸)對從初始外植體生長的組織的形態具有深遠的影響。
  7. 例如,過量的生長素通常會導致根部增殖,而過量的細胞分裂素可能會產生芽。
  8. 生長素和細胞分裂素的平衡通常會產生無組織的細胞或愈傷組織生長,但是生長的形態將取決于植物種類以及培養基組成。
  9. 隨著培養物的生長,通常將切片切成薄片,然后將其繼代培養到新的培養基上,以使其生長或改變培養物的形態。組織培養者的技能和經驗對于判斷培養的碎片和丟棄的碎片很重要。
  10. 當芽從培養物中出來時,可以將它們切成薄片并與生長素生根,以產生小植株,當小植株成熟時,可以將其轉移到盆栽土壤中,以作為普通植物在溫室中進一步生長。
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